解放军医学院学报杂志

解放军医学院学报杂志2023年第4期

• 从宏观解剖到微观分子成像看糖尿病胰腺的可视化技术进展

  谭文彬, 李佳

  胰腺作为分泌胰岛素的器官，随糖尿病(diabetes mellitus，DM)的发生、发展而产生相应病理改变，这其中可能蕴含着DM发病及进展的关键信息。除各种生化指标外，胰腺影像学也提供了反映DM胰腺的相关信息。超声、CT、磁共振及核医学成像技术，分别从胰腺外形、血流动力学信息、分子成像等方面实现非侵入性可视化DM患者胰腺。近年来，基于磁共振及核医学成像的β细胞成像技术取得了重大进展，尤其是利用核素标记胰高血糖素样肽-1受体靶向探针量化胰岛β细胞总数(β-cell mass，BCM)技术已初显成效，为胰岛BCM检测提供了先进的可视化方法。但受限于各类成像技术的应用条件且缺乏临床数据、判读标准和评估方法等，目前临床上仍无准确有效且安全性高的特异性评估DM胰腺成像方法。本文详细阐述了DM胰腺可视化技术的研究进展，以期为开发评估DM患者胰腺影像学工具提供参考。

• 不同类型胃恶性神经内分泌肿瘤与胃腺癌的临床病理特征和生存情况比较

  张奔龙, 高云鹤, 鲁意迅, 李力, 梁文全, 郗洪庆, 王鑫鑫, 张珂诚, 陈凛

    背景  胃恶性神经内分泌肿瘤包括胃神经内分泌癌和含有神经内分泌癌成分的混合性神经内分泌-非神经内分泌肿瘤，混合性神经内分泌-非神经内分泌肿瘤绝大多数为腺-神经内分泌癌，因其罕见性，目前缺乏系统性的研究提高对其临床病理特征及预后的认识。   目的  以胃腺癌为参照，探究胃恶性神经内分泌肿瘤的临床病理特征和生存情况。   方法  采用回顾性病例对照研究的方法，收集2008年1月 - 2018年12月在解放军总医院第一医学中心行手术治疗的非cM1期胃恶性神经内分泌肿瘤及胃腺癌患者资料，分析、比较其临床病理特征。1：3倾向性评分匹配(PSM)调整胃恶性神经内分泌肿瘤和胃腺癌队列之间的混杂因素。Kaplan-Meier法绘制生存曲线，log-rank检验分析组间总生存率的差异，Cox回归模型分析患者预后的独立关联因素。   结果  共纳入5443例(96.0%)胃腺癌与226例(4.0%)胃恶性神经内分泌肿瘤，后者包括148例神经内分泌癌和78例腺-神经内分泌癌。胃恶性神经内分泌肿瘤与胃腺癌首诊年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、手术方法、胃切除方式、T分期、N分期、TNM分期的差异有统计学意义(P＜0.05)。2875例胃腺癌和215例胃恶性神经内分泌肿瘤有完整的生存信息，倾向性匹配后进行生存分析，发现胃腺癌患者的总生存率显著优于胃恶性神经内分泌肿瘤患者(3年、5年生存率：67.3% vs 58.9%，59.8% vs 48.3%，P=0.002)，亚组分析显示，胃腺癌患者的总生存率优于神经内分泌癌和腺-神经内分泌癌患者(3年、5年生存率：67.3% vs 57.5%和61.1%，59.8% vs 50.5%和44.9%，P均＜0.05)，但神经内分泌癌患者与腺-神经内分泌癌患者的总生存率无统计学差异(P=0.993)。对胃恶性神经内分泌肿瘤的分析显示，神经内分泌癌与腺-神经内分泌癌在首诊年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、手术方法、胃切除方式、T分期、N分期、TNM分期、免疫标记物表达上无统计学差异(P ＜0.05)。生存分析结果表明年龄(HR=1.945，95% CI：1.249 ~ 3.030)、肿瘤大小(HR=2.199，95% CI：1.029 ~ 4.701)、TNM分期Ⅱ期 vs Ⅰ期(HR=1.669，95% CI：0.596 ~ 4.670)，Ⅲ期 vs Ⅰ期(HR=5.710，95% CI：2.197 ~ 14.837)与胃恶性神经内分泌肿瘤患者生存独立关联。  结论  胃恶性神经内分泌肿瘤与胃腺癌有着截然不同的临床病理特征，胃恶性神经内分泌肿瘤浸润能力更强，侵袭性更高，总生存率显著劣于胃腺癌，神经内分泌癌和腺-神经内分泌癌有着相似的临床病理特征及总生存率；年龄≥60岁、肿瘤≥3 cm、Ⅲ期多提示胃恶性神经内分泌肿瘤患者较差的预后。

• 结直肠癌肝转移患者的临床表现及预后关联因素研究

  冯子夜, 李松岩, 滕达, 胡时栋, 刘帛岩, 杨星朋, 杜晓辉

    背景  在结直肠癌患者中，约50%患者在疾病发展过程中发生结直肠癌肝转移(colorectal liver metastases，CLM)且预后往往较差。肝转移灶同步切除可提高CLM患者预后水平。  目的  探讨CLM患者临床特征及预后的关联因素。  方法  回顾性分析2015年4月 - 2019年3月就诊于解放军总医院第一医学中心，诊断为同时性结直肠癌肝转移并行同期根治性切除术的患者，收集相关临床、原发灶及肝转移灶病理等资料，并对患者进行随访。根据患者肝转移灶分布位置，将患者分为单侧肝转移组及双侧肝转移组。通过单因素分析及Cox回归分析CLM患者术后预后的独立影响因素，并绘制Kaplan-Meier曲线比较患者术后总生存期(overall survival，OS)。  结果  共纳入符合条件患者157例，其中男性100例，女性57例，年龄31 ~ 82岁。按照转移灶位置分为单侧肝转移组和双侧肝转移组，利用倾向评分匹配方法对两组患者进行匹配，共成功匹配31组。双侧肝转移组患者肝转移灶数目＞3的比例显著高于单侧肝转移组(51.6% vs 9.7%，P＜0.05)，而OS 19.00(13.0，37.0)个月 vs 38.00(20.0，48.0)个月、3年生存率(29.0% vs 54.8%)显著低于单侧肝转移组(P＜0.05)。单因素分析显示，原发肿瘤位于右半结肠、原发肿瘤低分化、双侧肝转移、肝转移灶数目＞3、术前癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)＞10 ng/mL对CLM患者术后预后的影响差异显著(P＜0.05)。多因素分析显示，原发肿瘤位于右半结肠(HR=4.067， 95% CI：1.738 ~ 9.516，P=0.001)、分化程度为低分化(HR=2.482，95% CI：1.280 ~ 4.812，P=0.007)、双侧肝转移(HR=2.263，95% CI：1.008 ~ 5.079，P=0.048)、术前CEA＞10 ng/mL (HR=2.230，95% CI：1.048 ~ 4.747，P=0.037)、术前CA199＞27 ng/mL (HR=2.049，95% CI：1.008 ~ 4.166，P=0.048)均为影响患者预后的相关危险因素。  结论  双侧肝转移的CLM患者肝转移灶数量相对更多、OS及3年生存率相对较低。原发肿瘤位于右半结肠、原发肿瘤低分化、双侧肝转移、术前CEA＞10 ng/mL、术前CA199＞27 ng/mL是影响CLM患者预后的相关危险因素。

• 基于机器学习的创伤性休克患者院内死亡预测模型研究

  张晗, 张爱舷, 罗嘉琪, 张晓萌, 陈力

    背景  创伤性休克(traumatic shock，TS)是导致创伤患者死亡的重要原因，关注TS患者的预后具有重要意义。  目的  构建基于入院生命体征、入院血气分析等早期指标的机器学习模型，用以预测TS患者临床结局，辅助医务人员进行医疗决策。  方法  收集解放军总医院第一医学中心急诊科2014年6月 - 2021年12月收治的TS患者信息，分为建模队列和外部验证队列两个部分，基于决策树(decision tree，DT)、逻辑回归(logistic regression，LR)、随机森林(random forest，RF)三种分类算法建立院内死亡预测模型，比较不同模型的预测效能并选择最佳模型进行外部验证。  结果  建模过程中，筛选出TS患者281例，根据患者本次出院时是否存活，分为生存组(218例)和死亡组(63例)。内部验证中，RF模型获得的受试者工作特征曲线下面积(area under receiver operator characteristic curve，AUC)最高，为0.856(95% CI：0.847 ~ 0.865)，DT模型AUC为0.756(95% CI：0.740 ~ 0.772)，LR模型AUC为0.801(95% CI：0.780 ~ 0.822)。RF模型的准确率(0.807)、精确率(0.886)、召回率(0.866)、F值(0.876)、AUC(0.856)等分类器性能指标均值均大于0.8。在50例外部验证集中RF模型的表现与内部验证相似，提示RF模型对TS患者死亡风险识别能力较强。通过校准曲线和决策曲线评价三种模型的校准度和临床实用性，结果提示RF模型亦优于LR和DT模型。  结论   机器学习预测模型在预测TS患者院内死亡方面具有较好的应用前景。

• 24例泪腺黏液表皮样癌的临床特征分析

  智绪爽, 吴畏, 杨新吉, 黑砚, 吕小辉, 邓爱军

    背景  黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma，MEC)是常见的唾液腺肿瘤，极少数原发于泪腺，临床实践中认识有限。  目的  分析泪腺MEC的临床特征、影像表现、诊断治疗及预后。  方法  回顾性分析2010年1月 - 2021年12月解放军总医院第三医学中心连续收治的经组织病理学证实的24例泪腺MEC患者的临床、影像及病理资料。  结果  24例患者平均患病年龄为56.35岁，男女比例7∶1。临床表现：21例(87.5%)眼球突出，16例(66.7%)眶外上方可扪及肿物，3例(12.5%)眶周疼痛。初发为泪腺MEC有19例，泪腺多形性腺瘤术后恶变为MEC有5例；6例发生远处转移。10例泪腺MEC的CT图像中，7例呈不均匀软组织密度影，9例形状不规则，7例肿瘤内有钙化，7例肿瘤破坏周围骨质；8例泪腺MEC的MRI图像中，8例不均匀强化，均可见液化腔；4例形状呈不规则，3例侵犯颅内、鼻旁窦、颞窝。24例泪腺MEC均进行了手术切除。病理证实24例均为高级别泪腺MEC，其中20例(83.3%)可见肿瘤侵犯神经，肿瘤细胞坏死，4个以上的核分裂/10个高倍视野；9例(37.5%)可见侵犯骨质。随访7例患者中1例复发(随访时间为12个月)，6例患者未复发(平均随访时间为24.3个月)。  结论  高级别泪腺MEC好发于中老年男性，常表现为无痛性眼球突出；影像大多表现为眶外上方中密度占位病变，形状不规则，常发生钙化，多伴有骨质破坏，可见液化腔，可侵犯邻近组织结构；治疗以手术切除为主，但需警惕术后复发和远处转移的发生。

• 国产与进口精确放疗设备在直肠癌术后放疗中的临床剂量学比较

  曾铭玥, 冯林春, 丛小虎, 刘其腾

    背景  放射治疗是直肠癌主要治疗手段之一，国内放疗设备种类繁多、层次不一，基层医院放疗设备落后，大多以国产放疗设备为主。  目的  探讨国产与进口精确放疗设备在直肠癌术后放疗中的临床剂量学特点与治疗实施效率，为临床应用提供选择依据。  方法   从解放军总医院第一医学中心放射治疗科2017年7 - 10月治疗患者中选取10例局部进展期直肠癌根治术后放疗患者资料，分别采用国产加速器(A组)和进口加速器(B组)进行放疗计划设计和验证比较。通过剂量体积直方图对靶区及危及器官进行剂量统计，根据相应公式计算靶区适形指数(conformity index，CI)与均匀指数(homogeneity index，HI)，最后统计机器治疗时间和跳数。应用配对t检验进行统计学分析。  结果  国产与进口精确放疗设备的治疗计划均能满足靶区处方剂量及危及器官限量要求。两组计划中，B组靶区的D2%、D5%、D98%、CI和HI优于A组(P＜0.05)，但两组的D95%无统计学差异。在正常器官保护上，两组的小肠V30、双侧股骨头V40无统计学差异，而A组膀胱的V40优于B组(P＜0.05)。两组计划通过率无统计学差异，在计划实施效率上A组略优于B组(P＜0.05)。  结论  国产与进口精确放疗设备均能实现直肠癌术后调强放疗的靶区剂量分布要求，剂量学上安全可行，各级别医院可根据临床需求进行选择应用。

• 脐血Gal-9、IL-33水平与早期婴儿湿疹相关性的前瞻性研究

  杨云彦, 王文革, 杨云月, 卢旭俊

    背景  湿疹是婴儿时期最早出现、最常见的一种过敏性疾病，受环境、遗传、免疫等多种因素的影响，且发病机制尚未全面阐释。有半乳凝素-9(galectin-9，Gal-9)、白细胞介素-33(interleukin-10，IL-33)与支气管哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎等多种过敏性疾病密切相关的报道。  目的  分析脐血Gal-9、IL-33水平与42 d婴儿湿疹发生的相关性。  方法  收集2020年9月 - 2021年5月在空军特色医学中心产科出生的新生儿114例，新生儿出生时立即采集脐血，检测脐血Gal-9、IL-33水平。在生后42 d进行门诊随访，调查婴儿湿疹发生情况及母亲相关情况。根据是否发生湿疹分为湿疹组和无湿疹组，分别比较两组脐血Gal-9、IL-33水平与42 d婴儿湿疹发生的相关性；进行logistic逐步回归分析婴儿湿疹发生的相关危险因素；制作脐血IL-33的ROC曲线。   结果  湿疹组68例，无湿疹组46例，婴儿湿疹患病率为59.6%。两组在性别、胎龄、身长、出生体质量、分娩方式、喂养方式、家族过敏史、母亲年龄及母亲孕期是否患病方面差异均无统计学意义(P＞0.05)，在母亲哺乳期间是否进食易致敏食物有统计学差异(P＜0.05)。两组脐血Gal-9水平差异无统计学意义(P＞0.05)，脐血IL-33中位水平湿疹组高于无湿疹组31.03(15.42，44.80) pg/mL vs 22.42(12.25，32.53) pg/mL，P＜0.05，logistic逐步回归分析提示脐血IL-33高水平表达与母亲哺乳期间致敏饮食与42 d婴儿湿疹发生独立关联(P＜0.05)。脐血IL-33的ROC曲线结果显示AUC为0.619(95% CI：0.516 ~ 0.722)，特异度为82.6%，敏感度为41.2%。  结论  脐血Gal-9水平与42 d婴儿湿疹的相关性较差，脐血IL-33水平则与婴儿湿疹的发生存在相关性，且IL-33高水平表达是湿疹发生的相关危险因素，但对早期婴儿湿疹的预测价值较低。

• 嘌呤能离子通道型受体7对小鼠创伤性脑损伤后神经炎症及脑水肿的影响

  陶丙岩, 刘羽阳, 裴洁, 李灏, 王惠, 彭瑞云, 吴海涛, 张军

    背景  创伤性脑损伤(traumatic brain injury，TBI)后的炎症反应及脑水肿是造成颅内压升高等严重并发症的重要因素。嘌呤能离子通道型受体7(purinergic ligand-gated ion channel 7 receptor，P2X7R)具有介导先天免疫反应的重要作用，P2X7R的活化可触发炎症反应的激活，与神经系统疾病的炎症反应密切相关。  目的  观察P2X7R对小鼠创伤性脑损伤后神经炎症及脑水肿的影响。  方法  使用经典的控制性皮质撞击模型构建小鼠创伤性脑损伤模型。免疫荧光观察小胶质细胞形态和P2X7R含量变化，干湿重法测小鼠脑组织含水量。使用脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)作用于小胶质细胞系(BV2细胞系)模拟创伤性脑损伤后小胶质细胞的激活，Western blot测定BV2细胞系P2X7R蛋白含量，ELISA测定BV2细胞系肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)、IL-6和IL-12的表达水平；采用条件培养基共培养法探索活化的小胶质细胞对内皮细胞(bEnd3细胞系)的影响，Western blot测定bEnd3细胞系的紧密连接蛋白Claudin-5的蛋白含量。  结果  动物实验结果表明，急性创伤性脑损伤后小胶质细胞增多且显著活化，P2X7R主要表达于小胶质细胞，抑制P2X7R可降低创伤性脑损伤小鼠的脑组织含水量，显著缓解脑水肿(P＜0.05)。细胞实验结果显示，激活的小胶质细胞P2X7R含量升高，TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-12表达量显著增加，而抑制P2X7R可以减少上述炎症因子的分泌(P＜0.05)。共培养实验提示抑制P2X7R可增加创伤性脑损伤后内皮细胞紧密连接蛋白的表达量。  结论  抑制P2X7R有助于降低小鼠急性创伤性脑损伤继发的神经炎症和脑水肿，其作用机制有待进一步研究。

• 数字光处理成型氮化硅陶瓷牙科种植体的制备及其生物安全性的初步评价

  邹蓉芳, 毕鲁南, 黄阳, 冯暄淇, 冯璐, 江小霞, 李伶, 邓斌

    背景  氮化硅是一种前景广阔的生物植入材料，数字化光处理技术作为一种先进的3D打印技术，同时具备打印精度高和打印速度快的性能，目前尚缺乏数字光处理成型氮化硅作为牙科用植入材料的研究报道。  目的  使用数字光处理技术制备氮化硅陶瓷牙科种植体，评估其微观结构和机械性能，并初步评价其浸提液对小鼠成纤维细胞L929的影响。  方法  参考国标GB 30367-2013和GB/T 10700-2006，对数字光处理成型氮化硅陶瓷，采用三点弯曲法测试弯曲强度，单边预裂纹梁法测试断裂韧性，弯曲法测试弹性模量。应用小鼠成纤维细胞L929进行数字光处理成型氮化硅陶瓷浸提液细胞毒性、细胞增殖和细胞活力的检测。  结果  为了匹配牙槽骨的弹性模量，设计了低弹性模量氮化硅配方体系，数字光处理成型氮化硅陶瓷弹性模量为125 GPa，弯曲强度为243 MPa，断裂韧性为2.6 MPa·m1/2。细胞毒性实验结果显示，在不同浸提液浓度培养下的L929细胞相对存活率均高于80%。活死细胞荧光染色结果显示，浸提液组与对照组活死细胞数量均无统计学差异(P＞0.05)。流式结果示浸提液组增殖指数持续增加，细胞周期与对照组相比无统计学差异(P＞0.05)。  结论  数字光处理成型氮化硅陶瓷具有典型的氮化硅微观结构、良好的弹性模量和生物安全性，显示出了作为牙科种植体的临床应用潜力。

• 2型糖尿病对大鼠颌骨骨髓间充质干细胞生物学特性的影响及其机制研究

  李天琪, 孟祥博, 霍娜, 蔡川, 李帅臣, 周孙欣, 张彤

    背景  2型糖尿病患者骨代谢异常，颌骨骨质和骨量都发生明显改变，是牙周炎的全身促进因素之一。Wnt信号通路可以促进干细胞矿化并修复骨组织缺损。然而2型糖尿病影响下Wnt信号通路是否参与了对颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow mesenchymal stem cells，JBMMSCs)的成骨分化调控仍未可知。  目的  研究2型糖尿病对大鼠JBMMSCs增殖及分化等生物学特性的影响，并对其机制进行初步探索。  方法  选取连续两周随机血糖≥16.7mmoL/L的13周龄GK大鼠为2型糖尿病组，相同周龄的Wistar大鼠作为对照组，两组各10只；无菌条件下采用骨髓冲洗法与骨片消化法相结合的方法分离培养两组JBMMSCs作为研究对象。CCK-8法检测并比较两组细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞被诱导凋亡的能力。对JBMMSCs进行成骨、成脂诱导后，qRT-PCR评估成骨、成脂及Wnt信号通路相关基因的表达改变，碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)染色检测成骨诱导后ALP的表达变化，茜素红染色比较钙结节形成能力，油红O染色检测成脂诱导后脂滴形成能力。  结果  与对照组相比，2型糖尿病组JBMMSCs的增殖及克隆形成能力降低，凋亡早期与晚期的细胞比例增加(P＜0.05)。两组JBMMSCs成骨诱导后成骨相关基因ALP、OCN和 Runx2 mRNA表达升高，但2型糖尿病组低于对照组(P＜0.05)，2型糖尿病组钙结节形成能力和ALP染色面积及密度较对照组低(P＜0.05)。成脂诱导后，成脂相关基因的表达和脂滴的形成较对照组减少(P＜0.05)。2型糖尿病组JBMMSCs成骨诱导7 d后Wnt信号通路相关分子Wnt4、Wnt5a、Wnt7b的mRNA表达较对照组升高，β-catenin的表达水平较对照组低。  结论  2型糖尿病影响大鼠颌骨骨髓间充质干细胞的增殖和克隆、抑制成骨及成脂分化能力，其成骨能力的降低可能与Wnt信号通路相关。

• 冷诱导RNA结合蛋白在大鼠低体温性急性肺损伤中的表达变化

  徐耀迪, 王佳新, 陈旭昕, 张春阳, 王凡, 丁毅伟, 彭聪, 肖漓, 韩志海

    背景  海上遇难者落水后常死于海水长时间浸泡后的低体温及相关并发症，肺是低体温损伤的重要器官之一，但目前针对低体温造成急性肺损伤(acute lung injury，ALI)的研究相对匮乏。  目的  探讨冷诱导RNA结合蛋白(cold-inducible RNA-binding protein，CIRP)在低体温性ALI大鼠模型中的变化及其可能的作用机制。  方法  将40只雄性成年SD大鼠随机分为0 h组(0 h，8只)和实验组(32只)。实验组分别用低温海水浸泡12 h、16 h、20 h、24 h(每组8只)，构建低体温性ALI动物模型。ELISA检测白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、IL-1β、细胞外CIRP的含量，对肺组织进行HE染色、TUNEL染色和CIRP免疫组织化学染色，qRT-PCR检测CIRP mRNA的表达。  结果  与0 h组相比，实验组出现不同程度肺损伤，病理切片可见肺泡壁增厚或结构破坏，肺泡腔内出血，伴中性粒细胞和淋巴细胞浸润等； 16 h、20 h、24 h实验组血清中IL-6的表达显著增加，20 h、24 h实验组血清中IL-1β表达显著增加，差异均有统计学意义(P＜0.01)；各实验组大鼠血清中CIRP表达增加均有统计学差异(12 h、16 h、20 h组，P＜0.05；24 h组，P＜0.01)。TUNEL结果显示，各实验组的大鼠肺组织出现不同程度的细胞凋亡现象(P＜0.01)；通过炎症因子的表达水平、肺组织病理改变以及细胞凋亡情况选择低温海水浸泡24 h为最佳构建模型时间，免疫组织化学染色和qRT-PCR观察到24 h组肺组织内CIRP的表达增加。  结论  肺组织和外周血清的CIRP在低体温性ALI大鼠模型中随时间延长而表达增高，提示其可能与低体温致ALI相关，同时与炎症因子IL-1β、IL-6水平呈现一致性趋势变化，因此推测CIRP可能通过促进炎症因子释放发挥作用，本研究初步证实了CIRP在肺组织区域和整体与低体温ALI的相关性。

• 成骨前体细胞来源的外泌体对乳腺癌细胞迁移和增殖影响的研究

  阳琴娜, 元欣欣, 杜锐凯, 厉建伟, 李英贤, 千年松

    背景  乳腺癌骨转移是目前研究热点之一，骨微环境中成骨细胞可以促进肿瘤细胞存活并形成微转移，但目前鲜有成骨细胞来源的外泌体对乳腺癌作用的研究报道。  目的  探讨成骨前体细胞MC3T3-E1来源的外泌体对乳腺癌4T1和MDA-MB-231细胞迁移和增殖的影响。  方法  通过超高速离心法提取MC3T3-E1细胞来源的外泌体，透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析(nanopartic tracking analysis，NTA)和Western blot方法鉴定外泌体特性；利用划痕实验和Transwell实验检测分析MC3T3-E1来源的外泌体对乳腺癌4T1和MDA-MB-231细胞迁移的影响；CCK-8法和克隆形成实验检测MC3T3-E1来源的外泌体对乳腺癌4T1和MDA-MB-231细胞增殖的影响。  结果  MC3T3-E1细胞来源的外泌体具有膜结构囊状小泡，直径分布为100 ~ 200 nm，且表达外泌体标志蛋白Alix和TSG101。CCK-8活性实验结果显示，浓度为20 μg/mL的MC3T3-E1细胞来源的外泌体不影响乳腺癌细胞的活性，30 μg/mL、50 μg/mL的外泌体能够降低乳腺癌细胞活性。划痕实验和Transwell实验结果显示，20 μg/mL外泌体能够促进乳腺癌细胞的迁移(P＜0.05)。CCK-8增殖实验和细胞克隆形成实验结果显示，20 μg/mL外泌体能够促进乳腺癌细胞的增殖(P＜0.05)。  结论   MC3T3-E1来源的外泌体可以促进乳腺癌细胞的迁移和增殖，这为乳腺癌骨转移的治疗提供可能的靶点和治疗策略。

• 基于Wnt/β-catenin信号通路探究过表达miR-124对胃癌前病变模型大鼠的干预效果

  罗文, 王伟宁, 彭进, 曾微, 姚思, 张嘉怡

    背景  Wnt/β-catenin信号通路的活跃可以促进胃黏膜细胞的分裂和增长，增加癌变的可能。  目的  探究基于Wnt/β-catenin信号通路过表达miR-124对胃癌前病变模型大鼠的干预效果影响。  方法  选取43只SPF级Wistar大鼠作前瞻性研究，从中选取10只作为对照组(0.9%氯化钠注射液)，并将剩余33只大鼠构建胃癌前病变模型，最终建模成功30只，平均分为模型组(0.9%氯化钠注射液)、miR-124抑制剂组(miR-124 inhibitor)和miR-124模拟物组(miR-124 mimic)。  结果  与对照组相比，模型组、miR-124抑制剂组、miR-124模拟物组miR-124相对表达量下降，表皮细胞生长因子(epidermal growth factor，EGF)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)、白细胞介素-6(interleukin- 6，IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor，TNF-α)水平以及Wnt、β-catenin表达量升高(P均＜0.05)；与模型组相比，miR-124抑制剂组miR-124表达水平下降，EGF、EGFR、IL-6、TNF-α水平以及Wnt、β-catenin表达量升高，miR-124模拟物组miR-124相对表达量升高，EGF、EGFR、IL-6、TNF-α水平以及Wnt、β-catenin表达量降低(P均＜0.05)；与miR-124抑制剂组相比，miR-124模拟物组miR-124相对表达量升高，EGF、EGFR、IL-6、TNF-α水平以及Wnt、β-catenin表达量降低(P均＜0.05)。  结论  过表达miR-124可降低大鼠胃黏膜的损害，改善其炎症反应，其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路被抑制有关。

• 应用16S rDNA扩增子序列分析去卵巢骨丢失小鼠口腔菌群的变化

  陈浩彬, 罗世城, 曹祚, 张攻孜, 张书威, 隋熠, 盛晨, 石斌, 罗杨, 张立海

    背景  口腔微生物失调加重了多种口腔疾病和系统性疾病的进程。进入绝经后期的妇女罹患口腔黏膜病和加速牙周骨质丢失的风险更高，但口腔菌群变化与女性进入绝经后期之间的联系尚不清楚。  目的  应用16S rDNA扩增子测序，初步观察卵巢切除小鼠的口腔菌群结构变化。   方法  16只雌性C57BL/6J小鼠随机分为卵巢切除(ovariectomy，OVX)组和假手术(sham-operated，Sham)组。卵巢切除术4周后对股骨进行显微CT扫描和骨密度与骨参数的分析，取小鼠口腔拭子进行16S rDNA高通量测序。   结果  与Sham组比较，OVX组骨密度、骨体积分数、骨小梁厚度和骨小梁数量显著下降，骨表面积/骨体积和骨小梁分离度显著升高(P＜0.05)。两组的口腔菌群共同含有687种ASVs，Sham组特有1086种，OVX特有930种。OVX组的Chao1指数与Sham组差异无统计学意义，但Simpson指数显著低于Sham组(P＜0.05)。门水平上OVX组的拟杆菌门和梭杆菌门丰度较Sham组下降(P＜0.05)。属水平上OVX组的梭杆菌属、乳酸乳球菌属、萨特氏菌属等菌属的丰度相比SHAM组降低(P＜0.05)；放线菌属等菌属的丰度相比Sham组升高(P＜0.05)。LEfSe分析结果显示，Sham组厚壁菌门和芽孢杆菌纲(Bacilli)的相对丰度升高(P＜0.05)。  结论  卵巢切除小鼠出现骨丢失现象，并且口腔菌群的多样性和菌群结构发生了改变，初步为研究绝经后妇女口腔菌群改变与口腔疾病加重的关系提供依据。

• 过表达Miro1慢病毒载体的构建及Miro1高表达间充质干细胞稳定转染细胞株的建立与鉴定

  陈镜伊, 赵玲萍, 刘雯丽, 习佳飞, 梁志欣

    背景  线粒体转移是干细胞发挥免疫修复功能的重要机制之一，Miro1是线粒体转移过程的关键蛋白，但其动力学研究欠缺研究模型。  目的  构建过表达Miro1的间充质干细胞稳转细胞株，为线粒体动力学研究间充质干细胞的抗炎修复机制提供细胞模型。  方法  通过PCR扩增目的基因后进行Gibson反应、转化及Gateway等方法构建载体，并对载体进行酶切鉴定。慢病毒感染间充质干细胞后，使用嘌呤霉素进行药物筛选获得稳转细胞株。后续分为三组进行相关鉴定。(1) BMSC组：正常间充质干细胞；(2) Con-BMSC组：慢病毒空载体感染的间充质干细胞；(3) MiroHi-BMSC组：过表达Miro1的慢病毒载体感染的间充质干细胞。通过RT-qPCR、Western blot检测上述三组细胞Miro1的表达水平，并进行划痕试验、水平迁移实验、成骨及成脂诱导分化以鉴定干细胞特性。  结果  所构建的载体完成酶切鉴定，并成功获得过表达Miro1重组慢病毒载体pLV-EGFP:T2A:Puro-EF1A＞mRhot1/HA。经mRNA和蛋白水平检测，MiroHi-BMSC组的Miro1表达高于BMSC组和Con-BMSC组(P＜0.05)，干细胞水平、垂直迁移能力三组间差异无统计学意义(P＞0.05)，三组干细胞均可成功进行成脂及成骨诱导分化。  结论  通过慢病毒载体成功构建Miro1Hi-BMSCs稳转细胞株，且该稳转株仍保留干细胞特性，可用于间充质干细胞调控线粒体转移的相关研究。

• 3D打印磷酸钙涂层多孔镁金属支架的力学性能和生物相容性评估

  叶健廷, 缪铂尊, 熊英杰, 孟昊业, 单验博, 孙小涵, 卢雨征, 武艳斌, 林万程, 关聪聪, 刘修志, 王鑫, 许文静, 袁广银, 彭江, 周成福

  背景负重部位骨松质的大面积缺损修复是临床中一个待解决的难题，多孔镁金属结合磷酸钙(Ca-P)生物活性涂层有望克服这一难题，但缺乏相应力学和生物相容性评价。目的评价Ca-P涂层多孔镁金属支架的力学性能和生物相容性。方法采用选择性激光熔化3D打印工艺制备多孔镁金属支架，通过化学转化法在多孔纯镁金属支架表面制备Ca-P生物活性涂层，与无涂层镁金属支架做对比。采用扫描电子显微镜和能量色散X射线能谱对材料涂层的形貌、成分进行表征；通过压缩力学实验绘制应力-应变曲线，并计算支架屈服强度和弹性模量。采用CCK-8法、活死染色和细胞黏附等手段检测多孔镁金属支架的生物相容性。结果制备Ca-P涂层多孔镁金属支架；扫描电子显微镜和能量色散X线能谱结果显示多孔镁金属支架内部镁颗粒呈现出融合体状；Ca-P涂层由花瓣状晶粒以一定的取向相互堆叠而成，与基体无缝隙紧密结合。力学性能测试显示，Ca-P涂层多孔镁金属支架抗压强度高于无涂层支架(35.3 ± 0.7) Mpa vs (31.0 ± 1.0) Mpa，P=0.003，n=3，杨氏模量高于无涂层支架(656.0 ± 8.7) Mpa vs (623.0 ± 7.0) Mpa，P=0.007，n=3；生物相容性结果显示，相比空白组，Ca-P涂层支架有显著促增殖作用，无涂层支架有显著抑制作用。结论相比无涂层多孔镁金属支架，Ca-P涂层多孔镁金属支架力学性能优，生物相容性好，可用于负重部位骨松质缺损的修复。

• 侵袭性垂体瘤治疗方法的研究进展

  刘红艳, 谷伟军, 母义明

  垂体瘤是最常见的颅内肿瘤，大多数属于良性肿瘤。少数肿瘤呈侵袭性生长，其特点为侵袭周围的解剖结构、对常规治疗抵抗、术后早期复发率高。目前，侵袭性垂体瘤的治疗仍然是一个挑战。本文从三个方面综述侵袭性垂体瘤的治疗进展：(1)标准的治疗方案为再手术治疗或放射治疗，能在一定程度降低激素分泌水平，但不能控制肿瘤进展；(2)替莫唑胺被推荐作为侵袭性垂体瘤的一线化疗药物，但只对部分患者有效；(3)肽受体放射性核素治疗、新的分子靶向药物(mTOR抑制剂和表皮生长因子受体抑制剂)和免疫检查点抑制剂已用于治疗侵袭性垂体瘤的临床研究，并且取得了一定的治疗效果，给侵袭性垂体瘤患者带来了希望。

• MED19 (LCMR1) 基因在肿瘤中的表达及生物学功能的研究进展

  刘鹿, 陈良安

  中介体复合物(mediator complex subunit，MED)是广泛存在于酵母和哺乳动物体内的一种高度保守的多蛋白体复合物，参与转录因子与RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymerase Ⅱ，RNA pol-Ⅱ)间的信息传递过程。MED19作为人中介体复合物的亚基之一，与人生长发育，尤其是肿瘤发生发展密切相关。本文对人MED19基因的结构和生物学功能研究进展进行综述，为后续MED19研究提供依据与思路。