解放军医学院学报

国内刊号:10-1117/R

国际刊号:2095-5227

解放军医学院学报杂志2017年第6期:C型利钠利尿肽基因转染对骨髓间充质干细胞成软骨分化的影响

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作者:杨烁, 时权, 钱智勇, 刘东华, 郭希民, 徐娟

关键词:骨髓间充质干细胞, C型利钠利尿肽, 重组腺病毒, 软骨组织工程

目的 研究C型利钠利尿肽(C-type natriuretic peptide,CNP)基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成软骨分化能力的影响,为实现高质量基于间充质干细胞的组织工程软骨构建奠定基础。 方法 采用全骨髓培养法分离SD大鼠BMSCs并进行传代培养及多向分化能力鉴定。将已构建的含有人CNP基因和增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因的重组腺病毒(Ad-NPPC-eGFP)按照特定转染复数(multiplicity of infection,MOI)转染BMSCs,通过流式细胞仪检测转染效率,Real-time PCR检测转染后CNP mRNA表达情况,MTT实验检测转染后对细胞增殖的影响,阿尔新蓝染色检测转染后BMSCs体外诱导14 d及21 d时成软骨情况。 结果 成功获取了大鼠BMSCs,成脂、成骨分化诱导结果表明其具有较好的多向分化能力。腺病毒转染后细胞状态良好,转染效率较高,且未对细胞增殖产生显著影响(P> 0.05),转染后BMSCs CNP mRNA高表达(PP结论 含有CNP基因的重组腺病毒可在SD大鼠BMSCs中稳定表达,并表现出较好的体外诱导成软骨能力。

来源:2017年第6期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

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