解放军医学院学报

作者：徐莹莹, 王志辉, 王燕一

关键词：谷胱甘肽, 衍生化, 色谱法, 高效液相

目的 对全血中谷胱甘肽(glutathione，GSH)与N-乙基马来酰亚胺(N-ethylmaleimide，NEM)的衍生化反应条件进行比较，以达到完全衍生化。 方法 随机选取2016年4月- 2016年6月解放军总医院体检中心健康成年人60例(23 ～ 79岁，男29例，女31例)。分别采集静脉血2 ml，用于衍生化反应条件实验及GSH的正常值测定。应用高效液相色谱与质谱联用技术(liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS)分组分析温度、pH、反应时间等因素对衍生化过程的影响。A组：分别于室温(25℃)下反应10 min、30 min、60 min；B组：分别于50℃、60℃、70℃、80℃、90℃水浴加热10 min；C组：Tris-Cl缓冲液(pH=8)调节pH，于室温(25℃)，70℃、80℃、90℃水浴加热10 min；D组：样本衍生化后，分别于室温(25℃)，70℃、80℃、90℃水浴加热10 min，再加入蛋白沉淀试剂。 结果 D组衍生化反应较彻底且室温25℃亚组与其他组相比未衍生化GSH相对比率最低(P＜ 0.05)。应用D组方法检测健康成人全血中GSH为(1 471.61±269.43)μmol/L，氧化型谷胱甘肽为(0.84±0.38)μmol/L。 结论 当衍生化试剂NEM与沉淀蛋白试剂SSA分别加入时，无需另外调节pH以及温度就能达到较彻底的衍生化反应。

来源：2017年第7期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

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