解放军医学院学报

作者：李静静, 刘方杰, 高亚萍, 刘成华, 刘玉, 张军, 杨光

关键词：金黄色葡萄球菌, HU蛋白, 多克隆抗体, 生物膜

目的 探讨靶向金黄色葡萄球菌DNA结合蛋白HU的多克隆抗体是否能够抑制生物膜的形成。 方法 以金黄色葡萄球菌NCTC-8325基因组为模板，PCR扩增HU基因，构建重组表达载体pET-28a-HU，亚克隆至大肠埃希菌BL21(DE3)，利用IPTG诱导表达，通过镍亲和树脂纯化获得HU蛋白。利用多克隆抗体制备技术获得兔源抗HU血清，利用ProteinA树脂纯化多克隆抗体，利用ELISA和Western blot实验检测抗体亲和力，并通过金黄色葡萄球菌生物膜形成实验验证抗体活性。 结果 重组蛋白HU以可溶形式表达，成功制备了高滴度(> 1∶100 000)的兔源抗HU多克隆抗体。生物膜形成后结晶紫染色数据显示抗HU多克隆抗体浓度在75 μg/ml和0.6 μg/ml时OD595读值分别为0.052和1.220，Confocal实验表明抗HU多克隆抗体能够明显抑制金黄色葡萄球菌生物的形成，且呈浓度依赖性。 结论 靶向金黄色葡萄球菌HU蛋白的多克隆抗体能够抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成，这可能成为一种新的治疗金黄色葡萄球菌感染策略。

来源：2017年第12期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

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