解放军医学院学报

作者：王冰, 黄靖香, 卢世璧, 彭江

关键词：组织工程, 膀胱, 细胞外基质, 间充质干细胞

目的 探索化学法制备的猪膀胱细胞外基质(porcine bladder accellular matrix，PBAM)对人脐带Wharton胶间充质干细胞(Wharton's jelly mesenchymal stem cells，WJ-MSCs)的生物相容性，为组织工程膀胱的研究提供新的种子细胞。 方法 采用化学脱细胞法制备PBAM，行HE、甲苯胺蓝、Hoechst33258荧光染色检测脱细胞效果，扫描电镜观察PBAM形态，无水乙醇法检测其孔隙率。组织块法培养WJ-MSCs，观察形态并及行成骨、成脂诱导。比较不同浓度的PBAM浸提液对WJ-MSCs增殖的影响。实验组将WJ-MSCs复合至PBAM进行培养，对照组以DMEM培养，第3、5、7天收集细胞并计数，对细胞-支架复合物行Hoechst33258及AO染色，扫描电镜观察WJ-MSCs在PBAM上的生长状态。 结果 化学脱细胞法成功制备的PBAM。HE、甲苯胺蓝和Hoechst33258染色证实PBAM上无细胞残留，扫描电镜(SEM)观察PBAM表面呈多孔结构，孔隙率为93%。组织块法培养WJ-MSCs第6天可见WJ-MSCs呈鱼群样排列，行成脂、成骨诱导后，油红“O”和茜素红染色阳性。不同浓度PBAM浸提液对WJ-MSCs的增殖效果与DMEM培养液无差异。两组增殖高峰均在第5天，实验组细胞增加率高于对照组(P＜0.05)。将WJ-MSCs复合至PBAM培养第5天后，Hoechst33258染色见大量WJ-MSCs生长于PBAM表面，AO染色提示为活细胞。电镜扫描可见大量人脐带WJ-MSCs黏附生长。 结论 PBAM对WJ-MSCs具有较好的相容性，可为进一步研究组织工程膀胱提供实验基础。

来源：2018年第10期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

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