解放军医学院学报

作者：王思拓, 时权, 杨烁, 刘紫微, 邹蓉芳, 徐娟

关键词：牙龈间充质干细胞, 外泌体, 细胞增殖, 成骨分化, 成骨样细胞MC3T3-E1

  背景  牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells，GMSCs)来源外泌体具有与GMSCs相似的生物学功能，在组织工程领域具有良好的应用前景，但目前缺乏其在骨再生中应用的研究报道。  目的  探讨GMSCs来源外泌体对成骨样细胞MC3T3-E1体外增殖和成骨分化的影响。  方法  体外培养GMSCs，超速离心法提取GMSCs来源外泌体。共聚焦显微镜下观察MC3T3-E1细胞对外泌体的内化摄取。CCK-8法和划痕实验分别检测不同浓度外泌体作用下MC3T3-E1细胞增殖和迁移变化情况。外泌体作用于MC3T3-E1细胞后，碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)染色检测ALP活性，茜素红染色及定量实验检测钙结节形成状况；RT-qPCR法检测成骨相关基因ALP、COL1A1、RUNX2的mRNA表达水平。  结果  提取的GMSCs来源外泌体呈现类圆形膜状结构，大小在100 nm左右，表达CD63和Tsg101。外泌体能被MC3T3-E1摄取。GMSCs来源外泌体能够促进MC3T3-E1细胞的增殖和迁移(P＜0.05)，且呈剂量依赖性；外泌体作用下，MC3T3-E1细胞ALP活性增加(P＜0.05)，钙结节形成增多(P＜0.05)，成骨相关基因ALP、COL1A1、RUNX2的mRNA表达水平明显上调(P＜0.05)。  结论  GMSCs来源外泌体具有增强MC3T3-E1增殖及成骨分化的作用，这为GMSCs来源外泌体应用于骨再生治疗奠定基础。

来源：2022年第4期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

查看解放军医学院学报杂志2022年第4期