解放军医学院学报

作者：任章勇, 吕少诚, 王芳菲, 赵昕, 郎韧, 贺强

关键词：同种异体血管, 血管移植物, 血管保存, 深低温冷冻, 低温冷藏

  背景  低温冷藏保存(cold storage，CS)是目前临床医疗实践中常用的离体血管组织短期保存方式，但其有效保存时间及其对离体血管结构及功能的影响尚缺乏系统性的研究。  目的  探索低温冷藏与深低温冷冻对人体髂静脉保存效果的影响。  方法  来自12例器官捐献者的24条髂静脉作为研究对象，将其修剪为长约1.5 cm的血管段并随机分为低温冷藏保存组和深低温冷冻保存(frozen storage，FS)组，每个组240个静脉段。分别于保存1 d、3 d、5 d、1周、2周及4周时取出血管，通过MTT比色法及TUNEL荧光染色评估血管细胞存活情况和凋亡情况，通过极限应力试验评估血管机械性能，通过HE染色、Masson染色和EVG染色评估血管内皮细胞、平滑肌细胞、胶原纤维及弹性纤维的变化。  结果  随着保存时间的延长，两组血管的凋亡细胞均逐渐增多，细胞活性逐渐下降，抗张力性能逐渐减弱；在保存5 d内冷藏组及冷冻组均未出现明显的凋亡细胞，但随着保存时间延长，两组凋亡细胞均逐渐增多，在1周(6.09% ± 0.90% vs 3.96% ± 0.69%，P=0.001)、2周(34.58% ± 3.40% vs 17.45% ± 1.74%，P＜0.001)及4周(74.90% ± 5.68% vs 31.23% ± 1.52%，P＜0.001)时冷藏组凋亡指数均高于冷冻组；在细胞活性方面，在保存1 d(2.27 ± 0.22) OD/m vs (1.64 ± 0.30) OD/m，P=0.002和3 d(2.11 ± 0.14) OD/m vs (1.59 ± 0.31) OD/m，P=0.001时冷藏组细胞活性高于冷冻组，3 d ~ 2周时两组细胞活性相当，2周(0.83 ± 0.24) OD/m vs (1.29 ± 0.15) OD/m，P=0.001及4周(0.48 ± 0.27) OD/m vs (1.15 ± 0.27) OD/m，P＜0.001后冷藏组细胞活性低于冷冻组；在抗张力方面，1 d(11.98 ± 0.55) N vs (10.96 ± 0.56) N，P=0.004、3 d(11.88 ± 0.40) N vs (10.89 ± 0.60) N，P=0.002和5 d(11.72 ± 0.71) N vs (10.97 ± 0.55) N，P=0.004时，冷藏组抗张力性能强于冷冻组；1 ~ 2周之间两组抗张力效果相当，4周后冷藏组的抗张力性能弱于冷冻组(10.11 ± 0.48) N vs (10.73 ± 0.62) N，P=0.042。在血管管壁结构方面，冷藏保存2周后血管内皮细胞可见破坏脱落，保存4周后内皮细胞完全破坏脱落；冷冻保存4周后可见内皮细胞灶性脱落破坏；4周内，两组血管胶原纤维和弹力纤维均无明显破坏改变。  结论  2周内，低温冷藏方案对人体髂静脉的保存效果与深低温冷冻方案相当，两种方法均可作为离体静脉安全可靠的保存方案；4周后，深低温冷冻方案的保存效果优于低温冷藏。

来源：2022年第12期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

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