解放军医学院学报

作者：李梦月, 邵杨柳, 李雨晴, 王莉莉, 高晓宁

关键词：急性髓系白血病, AML1-ETO融合基因, DNA甲基化, 地西他滨, 程序性细胞死亡蛋白-配体2

  背景  复发难治性AML1-ETO融合基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)患者预后差。程序性细胞死亡蛋白-配体2 (programmed cell death-ligand 2，PD-L2)是参与白血病免疫逃逸的重要分子，研究去甲基化药物对白血病细胞中PD-L2分子表达的影响，对于优化用药方案具重要意义。  目的  分析AML1-ETO融合基因阳性的AML细胞中PD-L2分子启动子区甲基化水平及DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨(decitabine，DAC)对其表达的影响。  方法  以AML1-ETO融合基因阳性AML细胞系Kasumi-1以及两对AML1-ETO沉默(SKNO-1-PGK，SKNO-1-siA/E)或诱导细胞系(U937-MT，U937A/E，U937A/E + ZnSO4)为模型，采用终浓度为2.5 μmol/L的DAC或0.1%二甲基亚砜(对照)处理细胞72 h，其中Kasumi-1、SKNO-1-PGK细胞系设置0.25 μmol/L、1.0 μmol/L和2.5 μmol/L 3个浓度梯度。采用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测PD-L2 DNA启动子区特异性位点的甲基化水平；采用逆转录实时定量PCR技术检测PD-L2 mRNA表达水平。  结果  Kasumi-1、SKNO-1-PGK细胞系中PD-L2 DNA启动子区呈高甲基化水平，DAC处理后该区域DNA甲基化水平下降(94.3% vs 90.7%，88.6% vs 83.6%)。2.5 μmol/L DAC处理后的Kasumi-1、SKNO-1-PGK、SKNO-1-siA/E、U937A/E细胞中PD-L2 mRNA的相对表达水平均显著高于对照组(P均＜0.05)；特别是DAC处理后，沉默AML1-ETO基因的细胞系中PD-L2表达增加(SKNO-1-siA/E与SKNO-1-PGK相比上升35.80%，P=0.031)，过表达AML1-ETO基因的细胞系中PD-L2表达减少(U937A/E + ZnSO4与U937A/E相比下降95.51%，P=0.036)。经DAC处理后的Kasumi-1和SKNO-1-PGK细胞系中，PD-L2 mRNA表达呈浓度依赖性递增(Kasumi-1：r2=0.87；SKNO-1-PGK：r2=0.93。P均＜0.05)。  结论  AML1-ETO阳性AML细胞中PD-L2基因的表达受DNA甲基化调控，AML1-ETO可能参与了PD-L2基因表达的抑制。

来源：2023年第3期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

查看解放军医学院学报杂志2023年第3期