解放军医学院学报

作者：王雅迪, 刘一涵, 张鹤扬, 徐振华, 刘水蓉, 江小霞, 贺慧霞

关键词：颌骨骨髓间充质干细胞, 神经生长因子, 增殖, 凋亡, 迁移, 干细胞成骨分化

  背景  神经生长因子(nerve growth factor，NGF)是神经营养因子中的一类，能够促进中枢及外周神经元加速生长，修复损伤的神经系统，有研究证实NGF能促进中胚层来源的长骨骨髓间充质干细胞的成骨分化及骨形成，而NGF对外胚层来源的颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow mesenchymal stem cells，JBMMSCs)生物学特性的影响尚不明确。  目的  探讨NGF对JBMMSCs增殖、迁移、分化及凋亡特性的影响。  方法  原代培养小鼠JBMMSCs并鉴定。取第二代JBMMSCs加入含50 ng/mL NGF培养液孵育72h后，通过 CCK-8、qRT-PCR、Western blot及免疫荧光(immunofluorescence，IF)等方法检测细胞增殖及其相关标志物MCM-2、Ki67的表达；qRT-PCR、Western blot检测凋亡相关标志物Bcl-3、Bax的表达；划痕实验检测JBMMSCs迁移能力；碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)染色、qRT-PCR、Western blot及IF检测成骨相关标志物表达。  结果  CCK-8结果显示，50 ng/mL NGF可显著增强JBMMSCs第3天及第5天的OD值，Western blot及IF结果显示，50 ng/mL NGF可显著增强JBMMSCs 中增殖标志物Ki67、MCM-2的蛋白水平；划痕实验结果显示，50 ng/mL NGF可显著提高JBMMSCs的迁移率，有效缩小各个时间点的划痕面积；50 ng/mL NGF可有效增强JBMMSCs的碱性磷酸酶活性，上调ALP、OCN、RUNX2、BMP2的mRNA表达水平及ALP、OCN、BMP2、OPN、RUNX2的蛋白水平；此外，50 ng/mL NGF还可上调Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平，下调Bax的mRNA及蛋白表达水平。  结论  50 ng/mL NGF能有效提高JBMMSCs增殖、迁移及成骨分化能力，同时抑制其凋亡。

来源：2023年第5期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

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