解放军医学院学报

作者：翟婷, 达哇卓玛, 张雨薇, 樊海宁, 刘川川

关键词：肺动脉平滑肌细胞, Hoxa1, 增殖, 迁移, 表型转化, MEK/ERK信号通路

背景低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary arterial hypertension，HPH)是一种以血管阻力持续性升高和血管重塑为特征的进展性疾病。研究表明Hoxa1参与血管生成过程，但Hoxa1在调控肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells，PASMCs)中的作用尚不明确。目的本研究旨在确定Hoxa1对PASMCs增殖、迁移和表型转化的调控作用。方法使用Ⅱ型胶原酶消化分离培养原代大鼠PASMCs。采用1%低氧处理细胞构建低氧诱导的细胞模型，并检测24 h、48 h、72 h低氧处理的PASMCs中Hoxa1 mRNA和蛋白表达水平。采用干扰或过表达Hoxa1慢病毒下调或上调细胞中Hoxa1表达。慢病毒干扰实验分为常氧组(Normoxia)、低氧组(Hypoxia)、低氧空病毒组(Hypoxia + shRNA-NC)、低氧Hoxa1干扰病毒组(Hypoxia + shRNA-Hoxa1)；慢病毒过表达实验分为对照组(Control)、过表达空病毒组(LV-NC)、过表达Hoxa1组(LV-Hoxa1)。采用EdU检测细胞增殖能力；RT-qPCR检测Hoxa1 mRNA表达；Western blot检测Hoxa1、表型转化标志蛋白、MEK/ERK信号通路蛋白表达；免疫荧光检测Hoxa1、α-actin表达；免疫共沉淀实验确定Hoxa1与MEK的相互作用。结果成功分离培养PASMCs，并鉴定细胞表达α-SMA。低氧诱导下PASMCs中Hoxa1表达上调(P＜0.05)。低氧下Hoxa1沉默抑制PASMCs增殖和迁移，而常氧下Hoxa1过表达促进PASMCs增殖和迁移(P均＜0.05)。低氧下沉默Hoxa1导致Hypoxia + shRNA-Hoxa1组收缩型标志蛋白表达升高，合成型标蛋白表达降低(P＜0.05)。而在常氧下过表达Hoxa1导致LV-Hoxa1组收缩型标志蛋白降低，合成型标志蛋白升高(P均＜0.05)。此外，Hoxa1表达增加促进MEK/ERK信号通路激活。免疫共沉淀结果显示，Hoxa1与MEK存在相互作用。结论Hoxa1可能通过激活MEK/ERK通路促进PASMCs增殖、迁移和表型转化。

来源：2023年第11期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

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