解放军医学院学报

作者：李金秋, 马俊旗, 王成伟, 阿仙姑·哈斯木

关键词：宫颈癌, FOXC1, NF-κB信号通路, HPV16 E6, 细胞增殖, 细胞凋亡, 分子机制

背景人乳头瘤病毒16型(​human papillomavirus type 16，HPV16)E6致癌蛋白是宫颈癌发生的关键因子，然而其介导细胞增殖与凋亡的发生机制尚不十分清楚。目的本研究旨在探讨HPV16 E6是否通过FOXC1激活NF-κB通路，并阐明FOXC1在HPV阳性宫颈癌细胞增殖与凋亡中的调控机制。方法通过Western Blot检测宫颈癌组织及正常宫颈组织中FOXC1、Ki-67和Caspase-3蛋白的表达；构建FOXC1敲低(sh-FOXC1)的HPV阳性宫颈癌细胞模型(Siha、Hela)，利用Western blot检测FOXC1敲低后，细胞内Caspase-3、Bcl-2、Bax、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)和NF-κB p65蛋白表达变化；qRT-PCR检测FOXC1敲低后各组细胞内NF-κB下游促炎因子IL-6、TNF-α mRNA表达水平。利用平板克隆、TUNEL凋亡检测技术分析FOXC1敲低对细胞增殖、凋亡的影响；通过在Siha细胞中sh-FOXC1组中过表达HPV16 E6验证HPV16 E6与FOXC1-NF-κB轴的调控关系，通过Western blot检测各组细胞内E6、FOXC1、Caspase-3、Bcl-2、Bax、p-NF-κB p65和NF-κB p65蛋白表达变化；利用平板克隆、TUNEL凋亡检测技术检测各组细胞增殖凋亡能力变化。结果FOXC1蛋白表达量为正常组织的4.61倍，Ki-67表达升高2.17倍，而凋亡标志物Caspase-3表达降低至正常组织的38.82%(P＜0.01)。FOXC1蛋白在Siha、Hela细胞中的表达量分别为C33A细胞的5.43倍和21.41倍，为永生化宫颈上皮细胞HCerEpiC的6.41倍和25.49倍(P＜0.01)。Western blot结果显示，敲低FOXC1表达后sh-FOXC1组促凋亡蛋白Caspase-3、Bax表达较对照Siha组升高1.94倍和1.66倍(P＜0.05)；抗凋亡蛋白Bcl-2及p-NF-κB p65表达降低至55.41%和51.09%(P＜0.05)；总NF-κB p65无显著变化(P＞0.05)。qRT-PCR结果显示，与Siha组相比，sh-FOXC1细胞内NF-κB下游促炎因子IL-6、TNF-α mRNA表达降低(P＜0.01)。平板克隆实验和TUNEL凋亡检测结果显示，与sh-NON组相比，sh-FOXC1组细胞克隆形成率降至53.54%，凋亡水平升高，增加2.73倍(P＜0.01)，Hela细胞系的结果与其一致。在Siha细胞中，Western blot结果显示，与sh-FOXC1组相比，sh-FOXC1-OE E6组细胞内E6、FOXC1、p-NF-κB p65、Bcl-2蛋白表达分别回升1.36倍、4.17倍、4.26倍、3.34倍(P＜0.05)；Caspase-3、Bax表达回降至61.77%和68.94%(P＜0.05)；细胞克隆形成的集落数量回升2.83倍(P＜0.01)；细胞凋亡率降低至45.54%(P＜0.01)。结论HPV16 E6可能通过上调FOXC1激活NF-κB通路，进而促进宫颈癌细胞增殖并抑制凋亡，提示FOXC1可能成为HPV阳性宫颈癌治疗的潜在靶点。

来源：2025年第9期

《解放军医学院学报》期刊编辑部

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